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生物化学-题库

1、称取200mg淀粉酶的固体酶制剂配制成100毫升酶溶液，从中取出1毫升酶液，以为底物，用DNS法测定酶活力，得知每小时产生1200微克葡萄糖。另取2毫升酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.32毫克。若以每分钟产生l微克葡萄糖的酶量为1个活力单位计算。若该酶所含蛋白均为淀粉酶，且淀粉酶相对分子质量为1.0×107（6×105），由2个相同亚基组成。根据以上数据求：

（a）1毫升酶液中所含蛋白质量。（b）淀粉酶的比活力。

（c）1克酶制剂的总蛋白含量及总活力。（d）淀粉酶的转换数（以葡萄糖计）是多少？

答案： （a）1mg；（b）10u/mg；（c）0.5g；10000u；（d）4.63/s2、有一纯酶酶液，经检测，该酶遵循米氏动力学，相对分子质量为120×103，由6个相同亚基组成，含氮量为0.16mg/mL,?当[S]=Km时，每ml酶液的V=1200μmol/min，酶的一个活力单位规定为：在标准测定条件下，37℃、1min内水解1.0μmol底物所需要的酶量。问：

（1）每ml酶液的Vmax是多少？2400μmol/min；（2）最适条件下酶粉的比活力是多少？2400U/mg；（3）每mg酶在每秒钟内最多水解多少mol?底物？（4）酶的转换数是多少（假设每个亚基上有一个活性部位）？

答案： （1）mL的Vmax=2*1200μmol/min?=2400μmol/min（2）比活力=2400μmol/min/mg=2400U/mg（3）2400/（60×106）×1=4×10-5?mol（4）4×10-5÷1×10-3/120×103×1/6=800

3、已知酸性磷酸酯酶可催化磷酸苯二钠水解生成酚和无机磷。现从绿豆芽茎中提取到50 ml 的酸性磷酸酯酶粗酶液。从中取3 ml，用凯氏定氮法测得含蛋白氮0.6 mg 。再取1 ml 酶液，稀释15倍后取1ml以磷酸苯二钠为底物反应5分钟形成了 20μmol酚。酶活力单位：以每分钟能转化1 μmol 磷酸苯二钠的酶量为一个活力单位。试问：

①计算该酶液中的蛋白含量和酸性磷酸酯酶的比活力(U/mg)②总活力及理论最大反应速度 （以50 ml 酶液计）

答案： (1)该酶液中的蛋白质含量：(0.6/16%)/3=1.25mg/ml或（0.6*6.25）/3=1.25mg/ml；酶的比活力：15 * (20umol/5min)/1ml=60U/ml或：15 * (20umol/5min)/1.25mg=48U/mg；(2)总活力：60U/ml*50ml=3000U理论最大反应速度：3000 umol/min

4、称取200mg纤维素酶固体酶制剂配制成100毫升酶溶液，从中取出1毫升酶液，以羧甲基纤维素钠为底物，用DNS法测定酶活力，得知每小时产生1200微克葡萄糖。另取2毫升酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.32毫克。若以每分钟产生l微克葡萄糖的酶量为1个活力单位计算。根据以上数据求：

（a）1毫升酶液中所含蛋白质量。（b）纤维素酶的比活力。（c）1克酶制剂的总蛋白含量及总活力。

答案： （a）1mg；（b）10u/mg；（c）0.5g；10000u；

5、（1）对于一个遵循米氏动力学的酶而言，当[S]=Km时，若V=35μmol/min，Vmax是多少μmol/min？（2）接上题，当[S]=2×10 -5mo/L，V=40μmol/min，这个酶的Km是多少？

答案： （1）当[S]=Km时，V=1/2Vmax，则Vmax=2×35=70μmol/min；

（2）因为V=Vmax/ 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 催化焦磷酸水解或磷酸，其相对分子质量为120×103，由6个相同亚基组成。纯酶的Vmax为2800U/mg酶。它的一个活力单位规定为：在标准测定条件下，37℃、15min内水解10μmol焦磷酸所需要的酶量。问：

（1）酶mg酶在每秒钟内水解多少mol 底物？

（2）每mg酶中有多少mol的活性部位（假设每个亚基上有一个活性部位）？

（3）酶的转换数是多少？

答案： （1）2800×10/15×1/（60×106）×1=3.11×10-5 mol；?? （2）1×10-3/120×103×6=5×10-8 mol；?? （3）3.11×10-5÷1×10-3/120×103×1/6=622；

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