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革兰氏染色实验常见问题

①检查器材顺序？ ②第一遍检查显微镜时，要不要都复原？① 先上一排：玻片——接种环，后下排：生理盐水——无水乙醇，再检查酒精棉球——废液缸、擦镜纸、答题卡等。（检查瓶装器材时，用左手按住，右手拿胶头滴管滴一滴；洗瓶检查时要有一个防止水流出的动作）。

②折光镜不关，其他的复原。（在转动显微镜时必须顺时针！）2、第一个棉球消毒桌面时，消毒多大区域？大一点没关系，使实验操作区域尽可能大一点。（不能有缝隙，速度要快点）。3、玻片的位置？①用第四个酒精棉球擦拭后放在桌面消毒的区域（胸前半拳处）。第一次用酒精灯烤干后，也放在桌面消毒区域（胸前半拳处）。②制片（涂某某）后，烤干，将玻片放在废液缸上。4、废液缸的位置？①第四个棉球消毒完玻片后，先将废液缸拿出来放在右上角，再用棉球消毒废液缸口（延一个方向，消毒1-2圈）。（放在右上角时，靠近消毒区域即可。）②制片完成将酒精灯放好后，再将废液缸拿到桌面消毒区的中间，后面每次玻片冲洗都是在此区域。③染色完成，玻片用吸水纸吸完水放在废液缸上，再将废液缸放回右上角。5、消毒接种环时，铁丝是否需要烧红？需要。具体步骤是：用酒精棉球擦黑色塑料部分，用酒精灯烤红接种环铁丝，中间的金属部分需要在酒精灯上转着通过。6、吸水纸如何使用？几张？一张，玻片的下面随意擦拭，上面只能按压， 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 2







显微镜观察：程序正确、物象清晰

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正确进行显微镜维护

6







涂片均匀、染色均匀

5





结果

结果报告正确、简洁、规范

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文明操作

现场整理，“三废”处理，无设施器材损坏

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熟练度

30分钟内完成，不得延迟

3







合计

120





注意事项：

所有结果应写在答题卡上，考生要写好姓名、准考证号及工号。

时间到必须停止操作，如有违规现象，按违纪处理。





考核人：____________ 监考人：____________

注意事项：1.切忌涂片太厚在涂片时细菌挑得太多，没办法分开，在脱色时，就不能将第一次染上的结晶紫脱去，可能会使革兰氏阴性菌也出现紫色，误认为是革兰氏阳性菌。2.脱色时间一定控制好阳性菌透性小，不易被脱色；阴性菌透性大，易被脱色；但这是在固定的时间条件下的结果，如果延长脱色时间，也会使脱色剂渗透进阳性菌的细胞壁中，使染上的结晶紫脱去颜色，最后染上沙黄的颜色，误以为是革兰氏阴性菌。而脱色时间太短，又会使阴性菌染上的结晶紫不能完全脱色，出现紫色，误以为是革兰氏阳性菌。3.制片时注意在实际操作中，有的同学将玻片在火焰上烤得太久，改变了细菌原有的通透性，会使细菌的染色性发生变化，从而影响染色结果。

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