做实验需要注意的五大细节

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怎样学做实验(初步总结版)

2012.1.21-2.7

我其实做实验的经验不多,还不到三年。但是,这两年多以来,有过许多经验教训。最近实验室新来的研究生跟我学做实验,因此把自己的经验教训总结出来,一方面是为了对自己今后做实验有用,另一方面也希望对别人有所帮助。由于我的专业是生物学,所以我不确定本文是否适合其它专业。

学做实验,大概分为两种方法:向别人学习和自学。两者方法有所不同,下面分别介绍。

基本操作和基础知识

一般而言,做实验是很难完全自学的。所以,在开始学做实验的时候,最好有人指导。做实验的内容,大概分为基本操作和具体实验的操作。基本操作是具体实验的基础,例如:怎样量取容积,怎样测量和调节PH值,怎样清洗实验室器皿,无菌操作技术,怎样使用pipette,怎样配置溶液,怎样autoclave(高压蒸汽灭菌)等。学做实验的时候,应该先学最基本的操作,再学具体的实验。这些基本操作具有至关重要的作用,它直接决定了实验的成功率。

我不可能在本文中完全介绍这些基本操作,但是,我可以推荐几本书。第一本书是《分子生物学实验室工作手册》(英文名At the bench: a laboratory navigator)。这本书是生物医学研究生的入门书籍,我认为是必读书之一,而且建议精读三遍以上。本书中译本大约300多页,相对于将要介绍的其它几本书籍要薄很多。它介绍了怎样在实验室与他人相处,怎样建立实验室,怎样写实验记录,实验室的基本操作如试剂的配置、储藏和处理,无菌技术,细胞培养,离心,测PH值,电泳,显微镜的使用等。总而言之,本书基本上囊括了生物医学实验室日常遇到的问题和所有的基本操作,是生物医学研究生首选的入门书籍。我应该是从科学网上马臻 老师那里听到介绍的,不过具体的介绍文章忘记了。

第二本书是《分子克隆》(英文名Molecular cloning: a laboratory manual),本书被誉为分子生物学的圣经,几乎每一个生物实验室都有一本。本书介绍了分子生物学常用实验技术的基本原理和许多protocol。目前已经出版到第三版。第一版出版于 1982年,第二版出版于1989年,第三版出版于2001年。书中提供的protocol很经典,但是有些目前已经改进了。这本书很厚,第三版英文版有2000多页,所以几乎不可能也没有必要精读所有章节,只要阅读自己正在做的实验的相关内容就可以了。

我学习基本实验操作是大一大二的时候,那时候延续了高中时鄙视学校教育的习惯,而且根本不打算做科研,所以这些课程基本上是应付过去的。等到了后来决定做科研,才发现需要学习的基础知识太多太多。我希望有人能系统地教我一遍,可惜这是不可能的。于是,我一直在寻找一本系统介绍实验基础的书。我找了很久很久,直到有一天,当我看到《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》时,我知道我找的就是它。所以,我推荐的第三本书就是它。这本书从怎样量取体积,称取重量,测量PH值,测量浓度等最基本的操作说起,讲到配置溶液,细胞培养,PCR,样本的准备,层析,电泳,印迹实验,显微镜,酶促反应(PCR等)。这本书共有737页,讲的是每天做实验都要遇到的问题,详尽系统却又简明易懂。对于希望学好做实验的人而言,本书必须仔细阅读,对于希望成为实验高手的人而言,本书更应该精读。Current Protocol是Wiley出版社出版的一个实验室手册丛书,是生物医学实验经典丛书之一,目前有16本,包括:Neuroscience, Molecular b 内容过长,仅展示头部和尾部部分文字预览,全文请查看图片预览。 度就会不同,即使加样体积一样,实际的量也可能不一样。所以,一定要保证试剂是充分混匀。结冰的试剂,必须完全溶解才可以使用。容易沉淀的试剂,使用之前必须充分vortex后再快速离心一下才能使用。

五,备份

在《At the bench》一书里,作者说如果实验室发生起火等危急情况,首先应该抢救的不是试剂,而是实验记录。因为有了实验记录才可以完成论文。其实,为了防止实验记录丢失的情况,可以把实验记录扫描为PDF文档以备份。同时,对于重要的研究数据,最好整理成电子文档例如excel或word文档,并且养成对自己的电脑文件定期备份的习惯。此外,质粒、转化后的细菌也需要备份。最好备份两份以降低丢失的概率。

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