光激化学发光原理(1)
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光激化学发光初步了解
近半个世纪以来，临床化学微量免疫分析技术从上世纪60年代的放射免疫分析，70年代初的酶联免疫分析，到70年代末化学发光免疫分析，经历了标记物由放射性同位素（3H、14C、125I等）、酶（辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶）到化学发光物质（吖啶酯、鲁米诺等）的革和.新检测技术由手工操作到全自动检测的飞跃，带来了医学检验质量和数量的迅速提高；90年代问世的LOCI(Luminescent oxygen channeling immunoassay, LOCI)技术以其独特的能量传递机制和化学发光原理，实现了均相、一步法、免清洗和高通量检测，并以其高灵敏度和特异性等突出检测性能，和包括DNA检测、新药开发在内的广泛用途而为世人所瞩目。该技术最初由Ullman等人在1994年报道，后由PerkinElmer公司生产相关试剂(AlphaScreenTM)。我国科研工作者在学习国外技术的基础上，勇于探索，对该技术从试剂到设备进行了进一步改良，开发了拥有自主知识产权的光激化学发光系统(Light initiated chemiluminescence assay, 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 相互接近的化学能量传递是LiCA均相反应的基础。通常在LiCA反应体系中，微粒的浓度是很低的。两种微粒相互随机碰撞的几率很低，因此，反应体系的本底非常微弱。如果包被在微粒表面的生物分子相互作用，拉近了两个微粒的距离，例如形成免疫夹心或受体-配体复合物，这样就能产生能量的有效传递并发出光信号。
二．优势
光激化学发光(LiCA)的免疫反应属于均相反应模式，包被有抗体或抗原的感光珠与发光珠均匀分布在反应体系中，在分子作用力下自由运动，能更快速、充分的完成免疫反应，所以光激化学发光(LiCA)的免疫反应时间更短。
整个反应过程无需清洗和分离未结合的样本和试剂，降低了反应的系统误差，提高免疫反应的鲁棒性。
从激发光→高能态氧离子→发光珠→光信号四个反应的信号传递过程具有放大效应，且发光迅速，保证了测定的敏感性，提高了结果的灵敏度。
整个能量(光)的产生、传递和放大过程十分稳定，不易受到pH值、离子强度和温度的影响。
光激化学发光(LiCA)技术可应用到多种生物分子的测定，包括酶活性、受体-配体反应、低亲和力的反应、第二信使水平、DNA、RNA、蛋白质、多肽、碳水化合物。
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