以下为《b-柠檬果皮橙皮苷的高效液相色谱分析-3》的无排版文字预览，完整格式请下载

下载前请仔细阅读文字预览以及下方图片预览。图片预览是什么样的，下载的文档就是什么样的。

柠檬果皮橙皮苷的高效液相色谱分析

19食工2 古某某 ***0306

实验目的

进一步熟悉和掌握高效液相色谱议的结构。

学习高效液相色谱仪器的操作和注意事项等。

二、实验对象及原理

黄酮类化合物是一类具有2-苯基色原酮结构的化合物，广泛存在于在柑橘类水果中。柑橘类黄某某根据结构分为：黄酮、黄某某、黄某某、黄烷醇和花色苷，主要以糖苷或苷元的形式存在。橙皮苷属于典型的黄某某，分子式为C28H34O15，广泛存在于橘子、橙子和柠檬等柑橘类水果中。橙皮苷是维生素类药，能降低毛细管的脆性，保护毛细血管，防止微血管破裂出血的作用。常用于高血压病的辅助治疗用于增强毛细血管的韧性。橙皮甙的衍生物甲基橙皮甙，也是维生素P类药是治疗高血压和心肌梗塞的药物，医药工业中用作制药的原料，是中成药脉通的主要组成之一。

目前测量橙皮苷含量的测定方法主要有:紫外分光光度 、薄层扫描法 、气相色谱法、毛细管电泳法、高效液相色谱-质谱联用法、高效液相色谱法和超高效液相色谱法等。紫外分光光度法操作简便, 但特异性较差;薄层扫描法显色剂用量难于控制, 造成较大的误差;气相色谱法进样量少、敏感性高、选择性好, 样品制备过程复杂, 耗时长;毛细管电泳法测试速度快, 选择性高, 但仪器普及度不高;高效液相色谱-质谱联用法虽易于定性和定量, 但仪器价格昂贵, 使用成本高昂;高效液相色谱因其具有测定样品种类多、范围广、样品制备步骤少、分离效率高、测结.定果准确、灵敏度高、而且可有多种检测器供选择的优点, 在分析检测方面得到了广泛的应用。

色谱的分离原理是：溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出；又称为色层法、层析法。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

本实验以柠檬果皮为原料，先利用超声波辅助提取橙皮苷，再使用高效液相色谱对提取物中的橙皮苷利用外标法进行定量。

三、实验仪器和试剂

高效液相色谱仪（配紫外检测器）（岛津 LC-20A），千分之一天平（METTLER TOLEDO, PL203），超声清洗仪（ULTRSONIC CLEANER, MH-040HJ），离心机（**_*，湘仪L530），旋转蒸发仪（XX亚荣生化仪器厂，RE-52AA）。

甲醇（色谱纯），乙酸，一级水，75%乙醇（取 85mL 无水乙醇加入 15mL 纯水，混匀）

柠檬果皮橙皮苷标品制备

分别称取柠檬橙皮苷标准品 20 mg，分别置于 10 mL 容量瓶中，用甲醇溶解至接近刻度，超声处理 20 min 。配成浓度为 2 mg/mL 的标准储备液。于-18 ℃避光保存。

样品溶液的制备

将柠檬果皮洗净，进行真空冷冻干燥，粉碎过筛；

称取 500 mg（精确到 1 mg）样品于 10ml容量瓶中，用 75 %乙醇溶解稀释至快接近 10 mL，超声 40 min；

然后定容至 10mL，摇匀，4000 r/min 离心 10min；

取上清液进行旋转蒸发后加入60 %加入和适量NaOH溶液，调节pH=12，在65 ℃下提取2 h；

调节pH=4，并静置6 h，过滤得到橙皮苷结晶；然后加入10 mL甲醇溶解；

取适量复溶溶液过 0.22 μm有机滤膜，取滤液进液相分析。

四、实验条件和步骤

1. 色谱 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 对含有内标物的样品进行色谱分析。与内标法相比，外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。

本实验如何利用内标法对目标物质进行定性？如果利用内标法进行定量又如何做？

1、测定的结果较为准确，由于是通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。

2、操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱，因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定，上样体积的变化不会影响影响定量结果。

3、内标法抵消了上样体积，乃至流动相、检测器的影响。

[文章尾部最后300字内容到此结束,中间部分内容请查看底下的图片预览]请点击下方选择您需要的文档下载。

1. 品质课堂实施方案
2. 气相色谱培训总结
3. 华南农业大学实验报告气质联用仪法(GC-MS)
4. 由高效课堂到优效课堂初探——以《影响消费的因素》一课为例
5. 学校高效课堂实施方案
6. 二极管阵列检测器、紫外检测器
7. 酶膜反应器介绍
8. 4.16教研活动总结
9. 气质联用仪法（GC-MS）分析测定檀香籽油主成分 实验报告
10. 离子色谱仪升级改造方案
11. 艺术教育工作计划
12. 学习郭某某《轻松高效的管理工具》心得体会
13. 高效液相色谱流动相选择

以上为《b-柠檬果皮橙皮苷的高效液相色谱分析-3》的无排版文字预览，完整格式请下载

下载前请仔细阅读上面文字预览以及下方图片预览。图片预览是什么样的，下载的文档就是什么样的。