医学形态学实验报告

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学校代码:10184

延 边 大 学

***2020年医学形态学实验

实验报告书

课程名称:医学形态学实验

实验项目:阻塞性黄疸模型制备、肝缺血及肝缺血—再灌注模型制备

负责教师:李某某、许某某

2020级预防医学专业四组

组长:王某某(学号:***64)

同组人员:程 成(学号:***69 )

李某某(学号:***63 )

孙某某(学号:***60 )

实验报告提交日:2021年8月 1日

实验目的:

掌握小白鼠的捉拿与固定、注射方法。

掌握动物麻醉及正确使用手术器械的方法。

掌握固定、脱水、透明、浸蜡与包某某、切片、染色与封某某等一系列操作。

在显微镜下观察切面模型与正常组之间的不同点。

1.阻塞性黄疸模型制备:

1)掌握通过结扎胆总管的方式建立阻塞型黄疸动物模型的方法。

2)观察小鼠在肝外胆管阻塞的影响下肝细胞发生缺血和坏死、纤维组织向胆管伸展、纤维增生的形态学变化。

2.肝缺血及肝缺血—再灌注模型制备:

1)掌握采用动脉夹夹闭肠系膜上动脉的方式,建立肝缺血及肝缺血—再灌注致肝损伤模型的方法。

2)观察在处理因素的影响下,肝缺血及肝缺血—再灌注致肝组织功能障碍造成的形态学变化。

3)比较上述两者引起的不同形态学变化体会肝缺血及肝缺血—再灌注的致病机理。

二、实验材料及方法:

实验材料:

1.阻塞性黄疸模型制备:

1)动物:健康XX小白鼠,6-8周某某,体重18-22g。

2)器材:鼠笼、普通天平、手术板、缝线、缝针、持针器、手术剪、医用棉签、刀片、制作切片的系列仪器、试剂和设备。

3)药品:水合氯醛。

2. 肝缺血及肝缺血—再灌注模型制备:

1)动物:健康XX小白鼠,6-8周某某,体重18-22g。

2)器材:鼠笼、普通天平、手术板、动脉夹、手术剪、钝头镊子、医用棉签、医用纱布、刀片、制作切片的系列仪器、试剂和设备。

3)药品:水合氯醛。

实验方法:

一、阻塞性黄疸模型制备:

预实验阶段:

1、随机从鼠笼中选择两只小鼠作为胆总管结扎(BDL模型)组。

2、1)麻醉:

术前禁食不禁水12h,手术时间定于2021年7月14日上午8时至10时,小组采用相对无菌操作。取小鼠后称重。

捉拿:先用右手将鼠尾抓住并提起,将其旋转数周后放在实验台面上,在小鼠向前爬行时用力向后拉尾,此时用左手的拇指和食指捏住小白鼠两耳和头颈部皮肤,然后将鼠置于左手心中拉直后肢并用左手无名指和小指压紧尾巴和后肢,右手即可进行注射操作。

腹腔注射:本次实验麻醉方式采用腹腔注射方法,以左手抓住小白鼠,使腹部向上,右手将注射针头于左下腹部刺入皮下,使针头向前推0.5~1.0cm,再以45度角穿过腹肌,固定针头,缓缓注入药液。为避免伤及内脏,动物处于头低位,使内脏移向上腹。

(麻醉剂:本次实验采用5%水合氯醛作为麻醉剂,注射剂量为0.2ml/20g。麻醉效果观察:当实验小鼠呼吸深慢而平稳,明显迟钝,全身肌肉松弛,进行皮肤夹捏时无反射活动,即麻醉成功,可进行下一步操作。)

2)固定:将实验小鼠固定在手术台上,为避免小鼠窒息,固定前肢时两前肢间距不必过大。

3)备皮:用左手提起小鼠腹部膈尖处的皮肤,右手持备皮刀以斜向下45度的方向缓缓备皮,直至小鼠腹部呈粉红色。

4)消毒:用碘伏给小鼠的腹部消毒。

5)手术切口为剑突至剑突下约1 cm腹正中线纵向切口,用眼科剪依次剪开皮肤、腹膜,暴露胃,用蘸取生理盐水的医用棉签将十二指肠引出腹腔,找出胆总管。(注:此过程中无须将肠道组 内容过长,仅展示头部和尾部部分文字预览,全文请查看图片预览。 Yi-He;Stolz Donna;Geller David A. INOS is required for IRF1 activation in response to liver ischemia-reperfusion in mice[J].Molecular Medicine,2020,26(1):56. Abstract

[6]秦某某,赵某某,胡某某,陈文.胆总管结扎术造大鼠肝纤维化模型的研究[J].时珍国医国药,2012,23(04):803-805.

[7]184-192.孙某某、陈杰、袁芳等.2013.大鼠肝缺血再灌注模型建立与测评.热带医学杂志,13(4):390-392

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