降脂实验方案8.31
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降脂实验方案
研究预计起始时间：2021.9
研究预计结束时间：2021.10
1.实验目的
研究沙枣果实对高脂小鼠的降脂作用
实验材料
2.1实验所用试剂
高脂乳剂（配方：水相+油相，水相包括水、吐温-80（30ml）、猪胆酸盐（10g），油相包括猪油（200g）、胆固醇（100g）、丙基硫氧嘧啶（5g），具体操作方法为：
水相：将30ml吐温-80加入500毫升水中，搅拌至混悬，再加入10g猪胆酸盐，继续顺着一个方向贴壁搅拌即成，搅拌时间不宜过长，否则容易起泡，各组分混悬即可；
油相：将猪油放入烧杯中，用电炉子（温度要达到300度）加热至融化到达轻微冒烟的状态，注意温度不宜过高，以防着火，再加入100g胆固醇，5g丙基硫尿嘧啶，边加边搅拌至溶解，然后从电热套上移下来，降温至30-50℃左右，将水相加入油相，开始逐滴加入，一边加入一边迅速搅拌，接着逐渐提高加入的速度，并一直搅拌，直到最后完全混合成乳状，放凉后，分装入瓶中，放入冰箱备用。）、戊巴比妥、10％福尔马林、氯化钠注射液、戊二醛（固定，用于透射电镜）、苦味酸等。
2.2实验所用主要仪器
电子天平、烧杯3个、玻璃棒2个、电热套、量筒1个、离心机、称量纸、纱布、棉花、离心管（2ml、5ml、50ml）若干、玻璃皿若干、镊子、药匙、2ml注射器若干、灌胃针头、卷尺等。
实验系统
3.1实验动物
品系：小鼠 等级：SPF级别 性别：雄性
拟购入动物数量：115 拟使用动物数量：115
拟购入时年龄范围：5-6周某某 拟购入时体重范围：18-22g
供应单位：**_*进行实验动物订购
3.2动物的接受与检疫
3.2.1动物的接收
接收时间：
称量仪器：电子天平
3.2.2动物的检疫、适应
3.2.2.1检疫、适应时间：
检疫期间，每日由检疫人员对动物外观、一般状态进行观察并填写观察记录，若动物出现异常或体质弱，可能对试验有影响，则应剔除，在试验时不得使用。动物在使用前经兽医检查合格方可使用。
3.3动物检疫、适应期的识别方法
动物入室时，分笼饲养，制作检疫期笼卡，笼卡为白色纸。对全部动物分别进行鼠尾划线法作为检疫期识别方法，即在鼠尾用记号笔划线表示动物号，如果每笼5只动物，第一笼动物编号为1-5号，第二笼为6-10号，第三笼为11-15号，……，以此类推。
3.4动物的饲养管理
3.4.1动物的饲养环境
饲养密度：5只/笼
清扫与消毒：试验期间：①地面台面每天清洁消毒一次；②房间整体每周清洁消毒一次；③饮水瓶每天更换一次；④笼盒每周更换两次，盒盖每两周更换一次。现在用的消毒液有84、新洁尔灭，7天交替使用。
3.4.2饲料
SPF鼠料
给料方法：每周适量添加饲料，保证动物自由采食。
3.4.3饮用水
种类：纯水，由UPRO-250型纯水制备系统制备。
供水方法：由动物饮水瓶自由摄取。
3.4.4垫料
种类：垫料
换料方法：动物实验室人员从来间领出垫料后，运至相应屏障环境区域清洗消毒间，分装入已消毒的鼠盒，一同通过高压灭菌后传至接收房备用，屏障环境由垫料分装入笼具后连同笼具一起再换，一般一周更换2次。
3.4.5剩余动物的处理
无剩余动物产生。
3.4.6动物伦理与保护
本试验方案交由实验动物管理（伦理）委员会审查、批准后实施，完全按国家相关实验动物福利法规规定执行。
研究内容
4.1动物的分组与识别
选用检疫合格的小鼠115只，雄性，平均体重±20%均可入组，按体重随机分组为8组，正常组15只喂水喂 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 鼠115只，雄性，平均体重±20%均可入组，按体重随机分组为8组。
（2）正常组（A组10只）每天正常给水、给饲料，其余组每天灌胃高脂乳剂进行造模，同时预防组3组给与沙枣果实浓度高（a组15只）1、中（b组15只）、低（c组15只）。
（3）3周后随机取样，正常组2只，模型组8只剖杀（取血、取肝脏）和全部眼眶取血检测造模效果，预防组全部剖杀。
根据造模结果模型组进行二次分组，分别高脂模型组（B）、阳性药物组（C）、沙枣高剂量组（D）、低剂量组（E），其中B组15只、C组15只、D组15只、E组15只，其中C组给与阳性药组，D、E组给与沙枣高、低浓度，同时B-E组继续灌胃高脂乳剂继续进行造模。
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