LC溶剂使用注意事项

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LC溶剂使用注意事项

流动相溶剂应选择HPLC级溶剂或更高级别溶剂。流动相使用前用0.45/0.22μm滤膜过滤、清除微粒和灰尘。使用时务必盖好瓶盖。

水相流动相使用棕色瓶存放,水应用二次蒸馏水/18.2MΩ超纯水,且需现配现用,以免流动相因滋生微生物而造成系统污染。用缓冲盐做流动相时,必须过滤,且在使用前/后都要用水清洗流路,色谱柱需先用低比例有机相(有机相含量应不低于5%)的溶液冲洗,以免缓冲盐析出。绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置或更长时间。避免使用高浓度磷酸盐缓冲(>10mmol/l)

使用四元泵时,缓冲盐流动相/水相置于A/D通道中,有机相置于B/C通道中。

使用乙腈作为流动相时,注意避光,使用棕色瓶存放,避免乙腈聚合。

配置流动相以1-2天使用量为宜,切勿配置过量流动相,长时间置于溶剂瓶中。

洗针溶液的选择原则:根据分析化合物极性大小选择合适的溶剂

流动相恢复到室温后使用。水与有机溶剂混合时会发生吸热或者放热反应,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。

避免流动相的pH值过高或过低,确保在色谱柱耐受范围内(参考色谱柱说明书,不建议靠近PH范围的上下限使用)。

进行梯度实验时要注意梯度变化过程中流动相的互溶性,避免因流动相不互溶而导 内容过长,仅展示头部和尾部部分文字预览,全文请查看图片预览。 动较大时使用。

更换流动相时,注意泵腔和色谱柱里盐溶液和有机相是否互溶,使用高比例水相(比如80%水相)过渡盐相和有机相。

柱塞杆清洗:10/90异丙醇/水,不回收使用,每次开机确保柱塞杆清洗液充足。

检测系统反压,如有需要超声清洗或者更换在线过滤器。

进样器准备:

根据分析化合物极性大小,选择最适合的洗针溶液。

更换洗针溶液后,右击进样器prime洗针管路60s,分析方法设置洗针程序。

柱温箱准备:

选用恰当的接头连接不同厂家色谱柱,或使用箍锥前端可以伸缩的万能接头来适配不同厂家色谱柱,柱后采用红色Peek管线接入检测器入口。

流动相有盐溶液时,首先用高比例水相过渡色谱柱,然后让盐溶液进入色谱柱,避免盐析堵塞。

检测器准备:

当采用UHPLC方法时,一般采样频率设置20Hz~40Hz。

检测器流通池同样注意避免盐溶液和有机相直接相撞。

关机:

高比例水相(比如90%水相)冲洗所有通道去除缓冲盐溶液和颗粒物~30min

高比例有机相(比如90%甲醇)冲洗所有通道。

进样器在冲洗过程中Mainpass和Bypass两路反复切换5~10次,冲洗六通阀的流路和沟槽。

针座位置如有白色盐析,用纯水洗瓶冲洗干净后拭干。

采用适当的保存溶剂(比如甲醇)保存系统。

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