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铁皮石斛组织培养方案

石斛栽培一直未解决其存活率低、进入盛产期年限长等问题，故石斛药源一直处于紧张状态。因此，组织培养、遗传转化、菌根技术、悬浮培养等生物技术在石斛的应用意义重大，甚为迫切。丹棱顺龙乡幸福村地处丘陵地带，属亚热带气候，常年气候温和，四季分明，雨量充沛，给石斛生长提供了良好的生态环境。从2013年开始引进石斛品种，目前已种植60多亩，利用活树附生原生态栽培模式种植石斛，既保护了生态效益，又能产生一定的经济效益，真是守护青山、发展青山，得益于青山！

服务经济社会发展是大学的重要职能，推动高校科学发展的一个重要方面,就是要充分发挥好其服务地方经济发展职能。依托眉山药科***中草药栽培技术系，积极探索铁皮石斛组织培养体系的建立，更好的服务丹棱地方经济。具体实施方案如下：

一、实验生产场地

中药与营养***药用植物组织培养实训室

二、参与人员

中草药栽培与加工专业专任教师

三、实验材料

铁皮石斛种子、幼嫩植株，植物组织培养实验相关试剂等

四、具体实验方案

石斛的组织培养，可用种子、根、茎尖、茎节及叶等为外植体，应用组织培 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 天培养，在切口处长出4-6个芽，形成丛生芽簇。将丛生芽切割后，在芽增殖培养基中继续增殖培养，则可获得大量丛生芽。将上述丛生芽切割成某某，转入壮苗培养基MS（无激素）中培养，40天后，芽可发育成高3.0cm以上并具2-3片叶的健壮无根苗。再将经过壮苗培养的无根苗，转接到生根培养基1/2MS+IBA0.1mg/L中培养40-60天，在苗基部便可长出多条肉质、绿色气生根，形成完整植株。

3、炼苗与移栽：当试管苗有4-5片叶某某，并具有3-4条1-2cm长的根时，即可揭开瓶盖，在室内炼苗1周后，将再生植株移植于细土与有机肥（1：2）的栽培基质中，盖上薄膜，保持湿度90％以上，基质以湿润、不积水为宜，置通风阴凉处，成活率可达60％。或以碎砖4份，碎木炭1份，珍珠岩和蕨根适量组合为移栽基质，其既能透气，又能排水保水。经研究表明，铁皮石斛试管苗的出瓶移栽，在4-6月温度较高、湿度较大时的成活率最高。移栽后的小苗放在阴湿且通风地方，一周内不浇水，以防湿度过大而烂根。以后随植株生长而加强管理，则可确保铁皮石斛试管苗的成活。

2022年4月15日

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