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qPCR引物设计原则：

产物长度80-200bp;

引物长度18-25nt，上下游引物差别尽量不大于3bp;

3’端尽量避免高GC/AT含量区域 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 含量为40%~60%，4种碱基在引物种均匀分配；

尽量避开G/C或者A/T的连续结构；

尽量避免大于3bp的反向重复序列或自身互补序列存在。

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