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离子化方法选择:根据样品性质确定离子化方式
适合ESI(IS)的样品类型:
– 高极性化合物、蛋白质、肽类、低聚核苷酸等生物分子;
– 胺类、季某某等;
– 含杂原子化合物如氨基甲酸酯等
适合APCI的样品类型:
– 弱极性/中等极性的小分子,如脂肪酸,邻苯二甲酸等
– 含杂原子化合物如氨基甲酸酯、脲等
ESI不适合的化合物:极端非极性化合物如苯等;
APCI不适合的化合物:非挥发性样品;热稳定性差的样品
离子化方法选择
● 碱性化合物宜用正离子方式
● 酸性化合物宜用负离子方式
● 如未知,可能正负都要做
● 有些化合物正、负模式都出峰,选择灵敏度高的方式,不明确的
优先试用正离子方式
根据化合物类型选择流动相组成,甲醇-水,乙腈-水或甲醇-乙腈-水
一般正离子方式用甲醇,负离子方式用乙腈好些
● 流动 内容过长,仅展示头部和尾部部分文字预览,全文请查看图片预览。 LC条件是否合适,以后进行MRM等其他扫描方式的测定时参考。
质谱分离过程:进样,离子化, 离子分离, 离子检测, 质谱图
高效液相色谱(HPLC)是分离化合物范围最广,准确度高,对化合物破坏性小的快速分离方法,特别适用于有机生物分子的分离。
?质谱仪(MS)是灵敏度很高,对未知化合物的结构分析定性准确,对被测定化合物和相应标准样品的了解要求较低的定性手段。
??难挥发和/或热不稳定被分析物的离子化; 应用软电离技术
??流速不兼容:LC的传统柱流速1ml/min.或更高,而MS需在高真空条件下工作;
质谱仪离子源配置足够大抽气量的真空泵;
在进入质谱仪高真空区之前除去大量溶剂;
采用适当的分流装置;
使用小内径的LC柱—降低流速
流动相不兼容:LC分离时经常加不挥发性的缓冲液、添加剂等。
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