以下为《生理指标测定方法》的无排版文字预览，完整格式请下载

下载前请仔细阅读文字预览以及下方图片预览。图片预览是什么样的，下载的文档就是什么样的。

POD

原理：在有过氧化氢存在时pod能催化多酚类芳香族物质氧化成各种产物，如作用于愈创木某某（邻甲氧基苯酚）生成棕红色产物，该产物在470nm处有特征吸收峰且在一定范围内其颜色的深浅与产物的浓度成正比。

实验器材

计时器、200ul移液枪、高速离心机、研钵、分光光度计、2ml离心管

实验试剂

0.1M PH6.0磷酸缓冲溶液、0.05M PH7.8磷酸缓冲溶液、30%过氧化氢、0.1%愈创木某某、

三、反应液：0.1M PH6.0磷酸缓冲溶液200ml+30%过氧化氢112ul+愈创木某某76ul（愈创木粉不易溶解，需早配）

四、酶液的制备

剪取0.2g叶片于研钵中（稍微剪碎利于研磨），加少许石英砂，加入2ml0.05M PH7.8磷酸缓冲溶液在冰上研磨（提前在铝盒装水冰冻，多准备些冰袋），充分研磨均匀后 转入离心管，12000转15min。（高速离心机需要配平，用天平称出相差无几误差在0.0几之间装了酶液的离心管配对）

五、比色

以0.1M PH6.O磷酸缓冲溶液做参比调0，在比色杯中加入200ul上清液，再加3ml反应液，记录初始值，30s后记录值，测定波长：470nm（酶液浓度过高吸光值过大时可适当减少酶液用量或减少时间）。先加反应液后加酶液，准确计时，每次用反应液润洗即可。

POD=▲A×v×n/w×vt×t

V：酶提取液总体积，t：反应时间；vt测定时用酶液体积；n：稀释倍数

A：0.2M NaH2PO4（称7.8g定容到250ml·，）

0.1M PH6.0磷酸缓冲溶液

B：0.2M Na2HPO4（称3.582g定容到50ml）

109.5mlA＋15.5mlB定容到250ml

A:0.1M NaH2PO4（称0.78g定容到50ml）

0.05M PH7.8磷酸缓冲溶液

B:0.1M Na2HPO4（称1.791g定容到50ml）

4.25mlA＋45.75mlB定容到100ml

注：取样时可将样品放入装冰的泡沫盒中，如需放入液氮中保存时要将样品用结实的绳子绑住，保持样品竖直放入，以免样品卡在口中无法取出。实验过程中剩下的样品需要暂时保存时需放入冰箱冷藏层，切忌放入冷冻层。提前将需要的离心管写好标签，排列好，实验过程中装酶液时注意不要污染标签，盖离心管要确保盖某某，以免离心过程中漏夜。比色过程中出现爆表时，可以适当减少酶液量并标记好。实验结束时要用酒精认真清理离心机，以免发霉。

可溶性蛋白测定

原理：考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色，在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内（1-1000μg），蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比，故可用于蛋白质的定量测定。 考马斯亮蓝G-250于蛋白质结合反应十分迅速，2min左右即达到平衡。其结合物在室温下1h内保持稳定。此法灵敏度高，易于操作，干扰物质少，是一种比较好的定量法。其缺点是在蛋白质含量很高时线性偏低，且不同来源蛋白质与色素结合状况有一定差异。

仪器

10ml试管，高速离心机，分光光度计，研钵，200ul移液枪，冰盒，2ml离心管，滤纸

试剂

1、0.05M PH7.8磷酸缓冲溶液

2、考马斯亮蓝G250溶液（称100mg考马斯亮蓝溶于50ml90%乙醇中，加入85%磷酸100ml，再用水定容到1000ml，储存在棕色瓶中，常温下可保存一个月）

3、标准 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 0、0.20、0.30、0.40、0.50 mg/L；锌溶液浓度为0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 mg/L；铜溶液浓度为0.06、0.12、0.18、0.24、0.30 mg/L，使用原子吸收光谱仪测定吸光值，绘制标准曲线。

②矿质元素含量测定：将糯玉米籽粒粉末在干燥箱中105℃烘干至恒重，称1.0000 g样品置于消煮管中，加入15 mL硝酸和10 mL双氧水，盖上消煮管盖冷消煮过夜（一般为12 h）。次日在消煮炉上加热，加热时保持管内液体维持微沸状态，消煮至管内溶液澄清透亮时停止加热，冷却至室温后，过滤定容至50 mL容量瓶中，摇匀后在原子吸收光谱仪进行测定[89]。

[文章尾部最后300字内容到此结束,中间部分内容请查看底下的图片预览]请点击下方选择您需要的文档下载。

1. 第八章　水溶液中的离子平衡答题语言再规范
2. 实验三 三黄片薄层色谱鉴别
3. 未知一元弱酸解离平衡常数的测定
4. 信息条件下氧化还原反应方程式的书写
5. 化学测试试卷
6. 磷酸危险化学品安全周某某
7. 凝胶电泳实验
8. 中学（人教版）化学九年级下册：第十单元检测题
9. 生物第一章课堂检测
10. 离子大量共存专题-离子共存问题高考真题
11. 初三化学人教版溶液单元练习题及答案
12. 高三上学期理科化学周考试卷（1）

以上为《生理指标测定方法》的无排版文字预览，完整格式请下载

下载前请仔细阅读上面文字预览以及下方图片预览。图片预览是什么样的，下载的文档就是什么样的。